• 尊龙凯时

    单细胞全长转录组

    • 产品简介
    • 样本要求
    • FAQ

    尊龙凯时 单细胞全长转录组测序基于10x Genomics和Kinnex Single Cell串联技术，顺利获得二代测序+三代测序联用方法，不仅可以取得更加精细的细胞聚类、细胞注释，而且还可以挖掘到在发育生物学等研究中非要重要的可变剪切、融合基因、RNA水平突变等信息。

             
    样品要求
    细胞分离由合作方或安诺完成单细胞悬浮液的制备
    样品类型活体新鲜完整细胞的细胞悬浮液，冻存的细胞悬浮液，不适于经固定、染色等处理的样本
    样品总量总量>6*105个，同一个细胞平行准备2份（1份质检，1份实验）
    样品浓度700-1200个/μl
    样品质量细胞不能成团，少碎片，活性>85%，细胞直径<30 μm，不存在逆转录抑制剂及非细胞的核酸分子
    细胞冻存液保存分装保存于冻存液中，细胞冻存液：DMEM+20%FBS+10%DMSO
    冻存液细胞浓度100万个细胞/ml，每1 ml分装至1个冻存管
                   
    • Q：单细胞全长转录组实验流程
      A：
      前部分实验与10x Genomics单细胞转录组一致，顺利获得微流控平台将带有条形码和引物的凝胶珠与单个细胞包裹在油滴中。在每个GEM中，凝胶珠溶解，细胞裂解释放mRNA，顺利获得逆转录产生用于带Barcode和UMI信息的cDNA。然后将cDNA一分为二，同时进行二代建库测序和Kinnex Single Cell串联三代建库测序。